Produktbeschreibung
Färbesatz aus 4 gebrauchsfertigen Lösungen.
Grampositive Mikroorganismen erscheinen violett, gramnegative Mikroorganismen rosa bis rot.
Prinzip:
Die unterschiedliche Anfärbung grampositiver und gramnegativer Bakterien ist eng korreliert mit der unterschiedlichen Struktur der Zellwände der genannten Bakteriengruppen. Durch die Färbung mit Kristallviolett und die anschließende Beizung mit Lugolscher Lösung entsteht in der Zelle ein Farbstoff-Jod-Komplex, der bei grampositiven Bakterien unter der Einwirkung des Entfärbemittels (Alkohol, Aceton) infolge verminderter Zellwandpermeabilität in der Zelle festgehalten wird. Deshalb behalten grampositive Mikroorganismen die violette Färbung bei. Bei den gramnegativen Bakterien diffundiert der Farbstoff-Jod-Komplex unter Einwirkung des Entfärbemittels durch die Zellwand nach außen. Beider nachfolgenden Gegenfärbung mit Safranin nehmen die gramnegativen Keime diesen Farbstoff auf und erscheinen jetzt rosa bis rot.
Herstellung der Ausstriche - das A und O für eine erfolgreiche und eindeutige Färbung:
-auf einen Objektträger mit einer sterilen Öse oder einem Abstrichbesteck eine dünne Schicht der Probe (ideale Konzentration etwa 10Exp4 - 10 Exp5 Zellen / ml aufbringen);
-nach Lufttrocknung hitzefixieren, indem der Objektträger mehrfach durch eine Flamme gezogen wird (cave: eine zu starke Erhitzung des Objektträgers führt zur Zerstörung der Zell(wand)strukturen);
-zu geringe Zellkonzentrationen führen leicht zu falsch negativen Beurteilungen;
-eine unzureichende Fixierung (s.o.) kann dazu führen, dass die Zellen / Bakterien durch die Färbereagenzien selbst weggespült werden.
Die Gram-Färbetechnik schulen wir auch in unseren AUROSAN Hands-on Kursen: siehe www.aurosan.de
Downloads
Gebrauchsanweisung (0.28 MB)
GBA